دی‌اِی‌پی-آی برای رنگ‌آمیزی اسیدهای نوکلئیک / DAPI for nucleic acid staining - برند Sigma-Aldrich

دی‌اِی‌پی-آی برای رنگ‌آمیزی اسیدهای نوکلئیک / DAPI for nucleic acid staining - برند Sigma-Aldrich

5. *کشت سلول و بافت: رنگ‌آمیزی l l-بافت‌های l l-برش‌خورده (Tissue Sections) برای تعیین l l-موقعیت l l-سلولی.

---

[دانستنی‌های تخصصی و نکات کاربردی | Expert Insights & Facts]
نکات کلیدی برای خریداران:
- حساسیت به نور (Photobleaching): DAPI به شدت به نور حساس است. در صورت قرار گرفتن طولانی در معرض تابش، شدت فلورسانس آن کاهش می‌یابد. توصیه می‌شود محلول‌ها در لوله‌های تیره یا l l-فویل آلومینیومی نگهداری شوند.
- نفوذپذیری غشا: DAPI در حالت طبیعی به سختی از غشای سلول‌های زنده عبور می‌کند. برای رنگ‌آمیزی سلول‌های زنده، باید از غلظت‌های بالا استفاده کرد یا l l-سوراخ کردن غشا (Permeabilization) با مواد شیمیایی مانند Triton X-100 را انجام داد.
- حلالیت: این ماده در آب حلال است، اما برای تهیه استوک‌های غلیظ، استفاده از DMSO توصیه می‌شود.

---

[تحلیل فنی و مزایا | Technical Analysis]
- کنتراست بالا: به دلیل میل شدید به اتصال با DNA، نسبت l l-سیگنال به l l-نویز (S/N ratio) در تصاویر بسیار بالا است.
- پایداری در l l-سایکل: در صورت ذخیره‌سازی صحیح، پایداری شیمیایی بالایی دارد و l l-شدت تابش آن در بازه‌های زمانی طولانی تغییر نمی‌کند.
- تداخل حداقلی: با اکثر رنگ‌های فلورسنت دیگر (مانند GFP یا TRITC) سازگار است و تداخلی در l l-باندینگ l l-چندگانه (Multiplexing) ایجاد نمی‌کند.

---

[راهنمای نگهداری و ایمنی | Handling & Safety]
- شرایط نگهداری: در دمای ۴ درجه سانتی‌گراد (یخچال) یا ۲۰- درجه در جای خشک و l l-کاملاً دور از نور نگهداری شود.
- ایمنی: DAPI یک l l-عامل متداخل با DNA (Intercalating Agent) است و می‌تواند l l-جهش‌زا (Mutagenic) باشد.
- تجهیزات حفاظتی: استفاده از دستکش نیتریل و عینک ایمنی الزامی است. از تماس مستقیم پودر یا محلول با پوست و چشم‌ها جلوگیری کنید.
- دفع: پسماندهای حاوی DAPI باید به عنوان l l-مواد شیمیایی l l-سمی و l l-محیط‌زیستی جمع‌آوری و دفع گردند.

---

DAPI چیست ؟

DAPI (4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride) یک رنگ فلورسنت و نفوذپذیر سلولی است که به DNA متصل می شود.

کاربرد DAPI

DAPI چندین برابر حساس تر از اتیدیوم بروماید برای رنگ آمیزی DNA در ژل آگارز است. ممکن است برای فوتوفوتپرینت DNA، برای تشخیص پروب های آنیل شده در کاربردهای بلات با تجسم خاص کمپلکس دو رشته ای، و برای مطالعه تغییرات در DNA و تجزیه و تحلیل محتوای DNA در طول آپوپتوز با استفاده از فلوسیتومتری استفاده شود. همچنین نشان داده شده است که رنگ آمیزی DAPI یک روش تشخیص حساس و اختصاصی برای مایکوپلاسما است.
مناسب برای
رنگ آمیزی DNA در ژل آگارز
تجزیه و تحلیل تغییرات DNA در طول آپوپتوز
تشخیص مایکوپلاسما
فوتو ردیابی DNA
رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس سلول ها

DAPI استفاده شده است:
در پایش سریع آلودگی میکروبی
در تکنیک نواربندی کروموزومی
در تشخیص سلول های آپوپتوز
در میکروسکوپ فلورسانس برای ردیابی حرکت DisA (پروتئین اسکن یکپارچگی DNA) روی DNA Bacillus subtilis 
برای رنگ آمیزی دانه های گرده بالغ (0.5 میلی گرم در میلی لیتر) 

اقدامات بیوشیمی/فیزیول DAPI

پروب اتصال شیار کوچک فلورسنت قابل نفوذ به سلول برای DNA. به شیار کوچک DNA دو رشته ای (ترجیحاً به DNA غنی از AT) متصل می شود و یک کمپلکس پایدار تشکیل می دهد که تقریباً 20 برابر بیشتر از DAPI به تنهایی فلورسانس می کند.

احتیاط
از نور محافظت کنید.