دربازه آلبومین سرم گاوی چه میدانید؟
آلبومین سرم گاوی (BSA یا "کسر V") یک پروتئین آلبومین سرم است که از گاوها مشتق می شود. اغلب به عنوان استاندارد غلظت پروتئین در آزمایشات آزمایشگاهی استفاده می شود.
نام مستعار "کسر V" به آلبومین اشاره دارد که پنجمین بخش از روش اصلی خالص سازی Edwin Cohn است که از ویژگی های حلالیت متفاوت پروتئین های پلاسما استفاده می کند. با دستکاری غلظت حلال، pH، سطح نمک و دما، Cohn توانست "کسری" متوالی از پلاسمای خون را بیرون بکشد. این فرآیند ابتدا با آلبومین انسانی برای استفاده پزشکی تجاری شد و بعداً برای تولید BSA مورد استفاده قرار گرفت.
![](/storage/photos/2/1/Bovine_serum_albumin_3v03_crystal_structure.jpg)
خواص
طول کامل پلی پپتید پیش ساز BSA دارای 607 اسید آمینه (AAs) است. یک پپتید سیگنال 18 باقی مانده N ترمینال پس از ترشح از پروتئین پیش ساز جدا می شود، از این رو محصول پروتئین اولیه حاوی 589 باقی مانده اسید آمینه است. شش آمینو اسید اضافی برای تولید پروتئین BSA بالغ که حاوی 583 اسید آمینه است، جدا میشوند.
BSA دارای سه حوزه همولوگ اما از نظر ساختاری متفاوت است. دامنه ها با نام های I، II و III به دو زیر دامنه A و B تقسیم می شوند.
![](/storage/photos/2/1/250px-Sample_of_Bovine_Serum_Albumin.jpg)
تابع
BSA، مانند سایر آلبومینهای سرم، در تأمین فشار انکوتیک در مویرگها، انتقال اسیدهای چرب، بیلی روبین، مواد معدنی و هورمونها، و عملکرد هم بهعنوان یک ضد انعقاد و هم بهعنوان آنتیاکسیدان حیاتی است. تقریباً 6 محل اتصال اسیدهای چرب با زنجیره بلند مختلف روی پروتئین وجود دارد که سه قوی ترین آنها در هر دامنه یکی قرار دارند. BSA همچنین می تواند مواد دیگری مانند سالیسیلات، سولفونامیدها، بیلی روبین و سایر داروها را که به "سایت 1" در زیر دامنه IIA متصل می شوند، متصل کند، در حالی که تریپتوفان، تیروکسین، اکتانوات و سایر داروهایی که ماهیت معطر دارند به "سایت 2" متصل می شوند. زیر دامنه IIIA.
برنامه های کاربردی
BSA اغلب به عنوان مدلی برای سایر پروتئین های آلبومین سرم، به ویژه آلبومین سرم انسانی، که 76٪ از نظر ساختاری همولوگ است، استفاده می شود.
BSA کاربردهای بیوشیمیایی متعددی از جمله ELISAs (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)، ایمونوبلات و ایمونوهیستوشیمی دارد. از آنجا که BSA یک پروتئین کوچک، پایدار و نسبتاً غیر واکنشی است، اغلب به عنوان یک مسدود کننده در ایمونوهیستوشیمی استفاده می شود. در طول ایمونوهیستوشیمی، که فرآیندی است که از آنتیبادیها برای شناسایی آنتیژنها در سلولها استفاده میکند، بخشهای بافتی اغلب با مسدودکنندههای BSA برای اتصال به مکانهای اتصال غیر اختصاصی انکوبه میشوند. این اتصال BSA به محل های اتصال غیر اختصاصی، احتمال اتصال آنتی بادی ها را فقط به آنتی ژن های مورد نظر افزایش می دهد. مسدودکننده BSA حساسیت را با کاهش نویز پسزمینه بهبود میبخشد زیرا محلها با پروتئین نسبتاً غیر واکنشی پوشانده شدهاند. در طی این فرآیند، به حداقل رساندن اتصال غیراختصاصی آنتی بادی ها برای به دست آوردن بالاترین نسبت سیگنال به نویز ضروری است. BSA همچنین به عنوان یک ماده مغذی در کشت سلولی و میکروبی استفاده می شود. در هضمهای محدود، BSA برای تثبیت برخی آنزیمها در طول هضم DNA و جلوگیری از چسبیدن آنزیم به لولههای واکنش، نوک پیپتها و سایر عروق استفاده میشود. این پروتئین روی آنزیم های دیگری که برای تثبیت به آن نیاز ندارند، تأثیر نمی گذارد. BSA همچنین معمولاً برای تعیین مقدار پروتئین های دیگر، با مقایسه یک مقدار ناشناخته پروتئین با مقادیر شناخته شده BSA استفاده می شود (به سنجش پروتئین برادفورد مراجعه کنید). BSA به دلیل توانایی آن در افزایش سیگنال در سنجش، عدم تأثیر آن در بسیاری از واکنشهای بیوشیمیایی و هزینه پایین آن استفاده میشود، زیرا مقادیر زیادی از آن را میتوان به آسانی از خون گاو، محصول جانبی صنعت گاو، تصفیه کرد. کاربرد دیگر BSA این است که می توان از آن برای جداسازی موقت موادی استفاده کرد که فعالیت آنزیم مورد نیاز را مسدود می کنند و در نتیجه مانع از واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) می شوند. BSA به طور گسترده ای به عنوان یک الگو برای سنتز نانوساختارها و تعیین اثرات سمی یا مفید یون های فلزی و کمپلکس های آنها استفاده شده است.BSA همچنین ماده اصلی تشکیل دهنده سرم جنین گاوی، یک محیط کشت سلولی رایج است.
برای مشاهده آنالیز محصول اینجا کلیک کنید.